關(guān)于病毒采樣管的保存液你了解多少
點(diǎn)擊次數(shù)：1790 更新時(shí)間：2022-06-26
病毒采樣管是微生物采樣運(yùn)送管中的用于流感病毒、手足口病毒等病毒采樣的一種成套的采樣及運(yùn)送的離心管，又名標(biāo)本運(yùn)送管，現(xiàn)已成為一種商品化的產(chǎn)品。適用于流感病毒(普通流感、高致病性流感、甲型H1N1流感病毒等)、手足口病毒及其他類型的病毒采樣。同時(shí)也用于支原體、衣原體、脲原體等的采樣。
病毒采樣管保存液主要有兩種，一種是以運(yùn)送培養(yǎng)基為基礎(chǔ)改良的病毒維持液，另一種則為核酸提取裂解液改良的保存液。
前者的主要成分是Eagle's基礎(chǔ)培養(yǎng)液(MEM)或Hank's平衡鹽，添加了病毒生存所需的鹽類、氨基酸、維生素、葡萄糖以及蛋白質(zhì)，這種保存液使用酚紅鈉鹽做為指示劑，溶液pH值在6.6-8.0時(shí)溶液呈粉紅色。保存液中添加了必須的葡萄糖、L-谷氨酰胺和蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)的提供形式有胎牛血清或牛血清白蛋白，可以穩(wěn)定病毒的蛋白質(zhì)外殼。由于保存液營養(yǎng)成分豐富，有利于病毒的成活但是也有利于細(xì)菌的生長，如果保存液中污染了細(xì)菌，則會(huì)大量繁殖，其代謝產(chǎn)物中的二氧化碳會(huì)使保存液pH值下降，從粉紅色變?yōu)辄S色。因而大多數(shù)廠家都在配方中添加了抑菌劑成分，推薦使用的抑菌劑為青霉素、鏈霉素、慶大霉素及粘菌素B等，不推薦使用疊氮鈉、2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮(MCI)和5-氯-2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮(CMCI)等抑制劑，因?yàn)檫@些組分對PCR反應(yīng)有影響。由于這種保存液提供的樣本基本是活病毒，可以大程度保持樣本的原始性，后續(xù)不僅可以用于病毒的核酸提取檢測，還能用于病毒的培養(yǎng)和分離。但是用于檢測時(shí)應(yīng)該注意的是必須滅活以后再進(jìn)行核酸提取純化。
另一種以核酸提取裂解液為基礎(chǔ)配制的保存液，主要成分為平衡鹽類、EDTA螯合劑、胍鹽(如異硫氰酸胍、鹽酸胍等)、陰離子表面活性劑(如十二烷基硫酸鈉)、陽離子表面活性劑(如十四烷基三甲基草酸銨)、苯酚、8-羥基喹啉、二硫蘇糖醇(DTT)、蛋白酶K等幾種或多種組分，這種保存液是直接裂解病毒釋放核酸，消除核酸分解酶(RNase)，如果僅用于RT-PCR較為合適，但裂解液可以滅活病毒，這種樣本不能用于病毒的培養(yǎng)分離。
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